培养基制备一般在化验室中进行，主要是对培养基和玻璃仪器进行灭菌，主要设备为高压灭菌锅及于热灭菌箱，对无菌操作要求不高。
灭菌方法主要有干热、湿热灭菌等。
(1)干热灭菌 直接利用火焰将微生物烧死（如烧接种环、载玻片和试管口等）。不能用火焰灭菌的物品则利用热空气灭菌，将物品放在烘箱中加热。为了保证灭菌效果，一般规定：135~140℃灭菌3～5h; 160～170℃灭菌2～4h；180~200℃灭菌0.5～1h。此法适用于玻璃、金属和木质的器皿。在灭菌过程中或灭菌后未降温时，不宜打开箱门，否则纸与棉塞会燃烧，玻璃仪器也易破裂。
(2)湿热灭菌 在各类湿热灭菌法中，经高压蒸汽灭菌效果最好，其蒸汽温度可达121℃，能将耐热的芽孢在30min内全部杀死。但对某些易破坏的物质，如某些糖或有机含氧化合物，宜在0.06MPa下(11O℃)灭菌15~30min。使用高压灭菌锅时，尽量将锅内的冷空气排尽，以免压力表的指示压力已到规定值而锅内温度达不到要求温度。另外，灭菌结束后，要缓慢放汽，以免降压太快使液体培养基喷染棉塞。
3.保温室
恒温箱的容量有限，因此利用大三角瓶及卡氏罐等容器培养微生物，应放在保温室中进行。保温室不宜过大，通常面积为2㎡，高2m左右。墙壁用保温材料，室顶在适当位置设置换气筒。室内使用暖气或电热器配合自动控温调节设备进行控温，应注意安全。